实验服务
从细胞中提取基因组DNA和总RNA后，仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程，也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时，为防止核酸大分子的变性降解，必须在0～4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用，是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍，现普遍采用加入去污剂或加入EDTA、8-羟基喹啉、柠檬酸钠以除去核酸酶的激活剂Mg2+，就可以抑制核酸酶的活性，保证在提纯过程中核酸大分子的完整。 赫贝可以从多种材料中提取基因组DNA和总RNA，由于不同种类的材料中提取的基因组DNA和总RNA量不同，甚至是新鲜程度不同的同一种材料，差异也比较大。
服务说明 合生基因独特设计并构建了shRNA/miRNA质粒表达载体和慢病毒（Lentivirus）表达载体（组成型和诱导型的均可），可在细胞中（诱导或组成）过量表达或抑制特定的miRNA，从而帮助客户研究shRNA/miRNA过表达或抑制所引起的相关表型效应的变化。 合生基因为您提供优质、高效、个性化的载体订制服务，您可根据下表项内所列基因元件设计您的gRNA/CRISPR-Cas9表达载体。同时，如果表内元件不能满足您的要求或需要使用您的基因元件进行载体组装，请联系合生基因技术支持，我们的技术团队将根据您的要求设计全新的解决方案。
全基因合成(gene synthesis, custom gene synthesis)即基因合成，是基因获取手段之一，是用生物化学的方法将人工合成的寡核苷酸拼接成基因的一种技术。基因合成的原料是寡核苷酸,所以人工合成的基因序列不受模板的限制，可以是任何序列。如果说基因是生命软件，基因合成就是编写生命程序，这是与传统的基因克隆技术不同的地方, 后者是直接拷贝自然界已有的程序，自然受限很多。 合生基因利用具有独有的基因合成技术，为客户提供高通量的基因合成服务——包括序列的设计与优化、基因合成、基因克隆、用测序和酶切进行产品验证、制备μg级至mg级的质粒（可选择去除内毒素服务）等。 服务特点 合成技术优势：合生基因独有的基因合成技术，可以合成绝大部分基因，包括含有重复序列和二级结构的DNA序列。以上价格适用于绝大部分基因（包括含有轻度和中度重复或发夹的序列），对于极端复杂的基因，请询价。 免费表达系统优化：我们的生物信息平台可以根据您的表达系统优化目的序列，满足您的特殊需求。 免费标准载体克隆：合成的基因一般克隆到pMV(AmpR)或pKMV(KanR)中，经过测序验证，序列100%正确。如果基因无法克隆，我们将以PCR产物的形式交货，并只收取80%的费用。 特殊载体克隆策略：合生基因技术团队设计的克隆策略可以确保我们将基因插入到您感兴趣的任何载体的任一指定位置。我们的专家将确保您的后续实验无需再考虑酶切位点的限制。如果需要将合成基因克隆到您感兴趣的载体, 则另收费250元(
CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) /Cas (CRISPR-associated) 是最近几年出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。它是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。 此系统的工作原理是 crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与 tracrRNA （trans-activating RNA）结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物，此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。而通过人工设计这两种 RNA，可以改造形成具有引导作用的gRNA （guide RNA），足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。 作为一种 RNA 导向的 dsDNA 结合蛋白，Cas9 效应物核酸酶是已知的第一个统一因子 （unifying factor），它能够共定位 RNA、DNA 和蛋白，从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的 Cas9（ Cas9 nuclease-null）融合，并表达适当的 gRNA ，即可靶定任何 dsDNA 序列，而 RNA 可连接到gRNA 的末端，不影响 Cas9 的结合。因此，Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA，这为生物体的研究和改造带来巨大潜力。 技术优势 与RNAi技术相比，它有如下几个特点和优势： 1、在DNA水平对基因修饰，修饰的基因具有可遗传性。 2、基因调控方式多样，除了基因敲除方式以外，对进行基因敲入、转录激活、转录抑制等。 3、由于编码mRNA的DNA序列只占总DNA的极少部分，因此靶向DNA序列的CRISPR的靶标要比RNAi广得多。 与锌指核酸酶（ZFNs）和转录激活样效应核酸酶（Transcription activator-like effectorucleases, TALEN）相比较： 1、CRISPR-Cas9系统靶向指导序列为gRNA，编码gRNA的序列不超过100bp，用于CRISPR的gRNA识别序 列仅需20个核苷酸，因此比构建TALENs和ZENs更简单方便。 2、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除。 产品类型服务说明与技术要求服务周期CRISPR-Cas9表达载体构建根据客户需要，多种选择1-3周gRNA表达载体设计与构建每个基因不少于2个gRNA1-3周gRNA/ CRISPR-Cas9表达载体设计与构建每个基因不少于2个gRNA；根据客户需要，多种选择2-3周慢病毒介导的Cas9包装病毒滴度不少于108 TU/ml1-3周慢病毒介导的gRNA包装病毒滴度不少于108 TU/ml2-4周稳定表达Cas9细胞系不少于105个细胞6-8周稳定表达gRNA细胞系不少于105个细胞6-8周基因敲入细胞系不少于105个细胞2-3月基因敲除细胞系不少于105个细胞2-3月gRNA文库构建服务每个基因设计6~10个gRNA视实验难度