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染色质免疫沉淀-测序(ChIP-Seq)

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服务简介

一、 染色质免疫共沉淀测序概述

染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,通常用于转录因子结合位点或组蛋白特异性修饰位点的研究。将ChIP与新一代测序技术相结合的ChIP-Seq技术,能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段。

ChIP-Seq首先通过染色质免疫共沉淀技术(ChIP)特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,并对其进行纯化与文库构建,然后对富集得到的DNA片段进行高通量测序。研究人员通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段信息。



二、 染色质免疫共沉淀测序技术优势 
检测覆盖范围广:全基因组范围内扫描目标区域; 
检测分辨率高:更利于精确定位目标区域; 
样本需要量低:需要的免疫沉淀后的DNA量可低至5-10ng; 
可靠性好:避免了非特异性杂交,背景低; 
性价比高:花费较少即可检测全基因组,获取准确丰富的信息。 


三、 染色质免疫共沉淀测序研究内容 

通过富集peak检测,研究转录因子、RNA 聚合酶或其它蛋白在基因组上结合位点及其相关基因。提取peak区域的序列,寻找结合位点的motif,并对peak 进行基因、CpG 岛、GO和KEGG 等注释和分析。对于多个样品,可进行差异分析;

用于组蛋白修饰的表观遗传学研究。通过不同的特异性抗体检测DNA链的某一位置会出现何种组蛋白修饰,以及组蛋白修饰与基因表达的关系。


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