服务简介

实验技术原理：当用一定强度的激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量,基质-样品之间发生电荷转移使得样品分子电离，电离的样品在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即测定离子的质量电荷之比与离子的飞行时间成正比来检测离子。 MALDI-TOF的核心技术就是依据样品的质荷比(m/ z)的不同来进行检测，并测得样品的相对分子质量。本公司使用ABSciex 5800 MALDI-TOF/ TOF对蛋白质相对分子质量进行测试，准确可靠的获得蛋白质相对分子质量信息。MALDI-TOF/TOF是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱。正离子检测模式下通常会出现加质子峰([M+1]+)。但当样品分子中含有易与钠离子或钾离子结合的作用位点时，只要极少量的钠离子和钾离子的存在都会导致质谱图中出现加钠峰([M+23]+)和加钾峰( [M+39]+)。

实验仪器：5800 MALDI-TOF/TOF(AB Sciex)

实验试剂：CHCA（Sigma）、SA（Fluka）、ProteoMass Peptide & Protein MALDI-MS Calibration Kit (Sigma)、样品靶（AB SCIEX）

实验方法：

点样：μL蛋白样品点至样品靶上，自然干燥后，再取0.6 μL CHCA基质溶液点至对应靶位上并自然干燥，用相同方法在样品靶位相邻位置点标准品。

校准:在正离子模式下选择反射（线性）方法对样品测试范围进行校准测试。

相关参数如下：标准物质校准范围为：反射校准物质校准范围为:1046.542±0.5、1533.858±0.5、2465.199±0.5、3494.651±0.5; 线性标准物质校准范围为：5730.609±50、12362±50、16952±50    

测试样品：在正离子模式下选择反射（线性）方法测试样品分子量。    

质谱数据及图谱处理：5800 MALDI-TOF/TOF产生的原始数据及图谱由4000 Series Explorer V3.5软件导出。

样品要求：蛋白纯度＞90%，蛋白量＞30ug，液体或冻干粉。