服务简介

样品要求：蛋白纯度＞90%，蛋白量＞500ug，液体或冻干粉，浓度≥5mg/ml

实验原理仪器及方法：

本公司cIEF分析在Beckman-Coulter的PA800 plus药物分析系统上进行。在cIEF开始时，整个毛细管里面都充满了样品混合液。样品混合液是两性电解质、稳定剂、pI标准品以及目的蛋白质的混合。

在cIEF的分离过程包括两个步骤：聚焦和迁移。毛细管两端分别浸入阳性电解液和阴性电解液中，通入电压后，因为两端有氢离子和氢氧根离子，形成了pH梯度。在聚焦阶段，阴极稳定剂向阴极迁移，而阳极稳定剂向阳极迁移，并且有足量的阴极稳定剂来填充毛细管的出口段，确保两性电解质和蛋白质样品在通过检测窗口前完全聚焦并且在迁移时被检测到。

聚焦是双方向的，pH梯度在毛细管两端形成并且向中央迁移，最后阴极和阳极合并。聚焦时间需保证充分以形成完整的pH梯度。

形成pH梯度以后，Beckman-Coulter用电压的方法使标准品和待检测样品通过检测窗口。PA800使用乙酸作为化学稳定剂，最大限度的减少了流体动力引起的出峰（检测峰）变宽的现象，增加了检测灵敏度和准确性。

样品检测使用280nm光吸收。结果分析使用32Karat软件。