服务简介

实验流程

1.使用蛋白酶将蛋白质酶切为肽段混合物;

2.使用在线联用的LC-MS对多肽进行分离与检测，液相选择纳升液相色谱，质谱选择超高分辨率质谱仪；

3.使用检索软件根据MS2谱图信息与数据库进行比对，并使用国际主流的正反库搜库策略对假阳性结果进行过滤，最后得到可靠的肽段鉴定结果，进而得到蛋白质鉴定结果。同时对每个蛋白质鉴定到的特征性肽段色谱峰峰面积进行统计，以色谱峰面积作为蛋白质的丰度表征，进而对阳性样本与阴性样本蛋白质的丰度进行比较，丰度比值为1的，为非特异性结合蛋白，阳性样本中丰度显著高于阴性样本的为真实的可靠的互作蛋白。

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样品要求

1.银染、考染的样本不需要脱色；
2.样本低温寄送；
3.溶液样本须告知溶液组成；
4.溶液样本需告知蛋白总量;
5.跑胶的样本在制备时必须佩带手套、口罩、帽子、白大褂以避免自身角蛋白的污染；
6.使用阴性对照样本去除假阳性鉴定结果的实验，整个实验必须保证阳性与阴性样本前处理IP、富集等条件完全一致。

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交付结果

1.括实验流程；
2.前处理基本方法
3.LC-MS/MS参数
4.蛋白质鉴定结果列表与定量结果