首页 > 实验服务 > IP/CoIP/Pull-Down蛋白质鉴定

IP/CoIP/Pull-Down蛋白质鉴定

  • 蛋白质鉴定
  • 互作蛋白鉴定
  • 蛋白质定量

价格: 在线询价

地 址:北京

周 期:2-4周

服务简介

如何对互作蛋白进行鉴定是生物学研究中一项重要内容。本公司采用Thermo Fisher的LC-MS/MS在线联用系统对样本进行检测,与传统的蛋白质鉴定中经常用到的MALDI-TOF质谱系统相比,该方法灵敏度更高、蛋白肽段覆盖率更高、结果更可靠。该类样本的检测中经常碰到非特异性结合蛋白的问题,我们同时采用蛋白质定量手段来去除非特异性结合蛋白,非特异性结合蛋白在阳性与阴性对照样本中的定量比值接近于1,而真实的目标蛋白其含量在阳性对照样本中会显著高于阴性样本,通过该方法,我们能够可靠的鉴定到真实的相互作用蛋白。

服务详情

实验流程

1.使用蛋白酶将蛋白质酶切为肽段混合物;

2.使用在线联用的LC-MS对多肽进行分离与检测,液相选择纳升液相色谱,质谱选择超高分辨率质谱仪;

3.使用检索软件根据MS2谱图信息与数据库进行比对,并使用国际主流的正反库搜库策略对假阳性结果进行过滤,最后得到可靠的肽段鉴定结果,进而得到蛋白质鉴定结果。同时对每个蛋白质鉴定到的特征性肽段色谱峰峰面积进行统计,以色谱峰面积作为蛋白质的丰度表征,进而对阳性样本与阴性样本蛋白质的丰度进行比较,丰度比值为1的,为非特异性结合蛋白,阳性样本中丰度显著高于阴性样本的为真实的可靠的互作蛋白。

------------------------------------------------

样品要求

1.银染、考染的样本不需要脱色;
2.样本低温寄送;
3.溶液样本须告知溶液组成;
4.溶液样本需告知蛋白总量;
5.跑胶的样本在制备时必须佩带手套、口罩、帽子、白大褂以避免自身角蛋白的污染;
6.使用阴性对照样本去除假阳性鉴定结果的实验,整个实验必须保证阳性与阴性样本前处理IP、富集等条件完全一致。

------------------------------------------------

交付结果

1.括实验流程;
2.前处理基本方法
3.LC-MS/MS参数
4.蛋白质鉴定结果列表与定量结果

询价人

询价时间

预算

暂无询价记录