服务简介

CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) /Cas 
(CRISPR-associated) 是最近几年出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。它是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。

此系统的工作原理是 crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与 tracrRNA （trans-activating RNA）结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物，此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。而通过人工设计这两种 RNA，可以改造形成具有引导作用的gRNA （guide RNA），足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。
作为一种 RNA 导向的 dsDNA 结合蛋白，Cas9 效应物核酸酶是已知的第一个统一因子 （unifying factor），它能够共定位 RNA、DNA 和蛋白，从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的 Cas9（ Cas9 nuclease-null）融合，并表达适当的 gRNA ，即可靶定任何 dsDNA 序列，而 RNA 可连接到gRNA 的末端，不影响 Cas9 的结合。因此，Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA，这为生物体的研究和改造带来巨大潜力。
技术优势
与RNAi技术相比，它有如下几个特点和优势：
1、在DNA水平对基因修饰，修饰的基因具有可遗传性。
2、基因调控方式多样，除了基因敲除方式以外，对进行基因敲入、转录激活、转录抑制等。
3、由于编码mRNA的DNA序列只占总DNA的极少部分，因此靶向DNA序列的CRISPR的靶标要比RNAi广得多。
与锌指核酸酶（ZFNs）和转录激活样效应核酸酶（Transcription activator-like effectorucleases, TALEN）相比较：
1、CRISPR-Cas9系统靶向指导序列为gRNA，编码gRNA的序列不超过100bp，用于CRISPR的gRNA识别序
列仅需20个核苷酸，因此比构建TALENs和ZENs更简单方便。

2、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除。

产品类型服务说明与技术要求服务周期CRISPR-Cas9表达载体构建根据客户需要，多种选择1-3周gRNA表达载体设计与构建每个基因不少于2个gRNA1-3周gRNA/ CRISPR-Cas9表达载体设计与构建每个基因不少于2个gRNA；根据客户需要，多种选择2-3周慢病毒介导的Cas9包装病毒滴度不少于108 TU/ml1-3周慢病毒介导的gRNA包装病毒滴度不少于108 TU/ml2-4周稳定表达Cas9细胞系不少于105个细胞6-8周稳定表达gRNA细胞系不少于105个细胞6-8周基因敲入细胞系不少于105个细胞2-3月基因敲除细胞系不少于105个细胞2-3月gRNA文库构建服务每个基因设计6~10个gRNA视实验难度