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细胞凋亡检测

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服务简介

细胞凋亡简介

细胞凋亡分为病理性凋亡和生理性凋亡两种,生理性凋亡由遗传控制,受既定程序(或基因)调控,属于程序性的细胞死亡;病理性凋亡是非遗传控制的细胞的意外坏死,区别于细胞坏死

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流式细胞检测原理

细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上发生特征性改变。由于凋亡细胞核的改变,荧光染料对凋亡细胞的DNA可染性发生改变,主要是DNA可染性的降低。凋亡细胞形态的改变影响光的散射性,在流式细胞仪中,散射光有两种:前散射光和侧散射光,前散射光与细胞的大小有关,侧散射光与细胞内颗粒多少有关,反应的是细胞内光的散射情况。

Annexin-V是一种分子量在35~#6kDa的钙离子依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine PS)高亲和力特异性结合,以标记的FITC的Annexin-V作为探针,利用流式细胞仪检测细胞凋亡。PI是一种核苷酸它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡的中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过而使细胞核染成红色,将Annexin-V于匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开。

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实验室检测流程

1、收集细胞

2、洗涤细胞

3、预冷的70%乙醛固定细胞

4、PBS细胞重悬

5、细胞过滤

6、PI染色,4℃避光30min

结果判断

PI用氩离子激发荧光,激光光波波长为488 nm,发射光波波长大于630 nm,产生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。

检测示例

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客户提供

1、实验信息,包括细胞类型,细胞处理药物和条件。

2、实验结果要求等。

服务流程

1、提交项目课题相关需求和资料。

2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。

3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。

4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。

5、开展实验,按期完成合同规定的内容。

6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。

我们的优势

1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。

2、专业的操作人员。

3、高规格实验室。

4、数据结果交付周期快。

5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。



服务详情

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