实验步骤

(1) 将24孔板和1ml的头放置冰箱或冰上预冷20-30min，从-20℃冰箱中取出Matrigel基质胶，将其置于4℃冰箱待其融化。

(2) 铺胶：取250 μl/孔Matrigel基质胶加入24孔板中，加入时避免产生气泡，置于细胞培养箱中60min待其凝固。

(3) 加入1ml 含EDTA的胰酶消化细胞，待消化完全后，加入含血清培养液终止消化，计数后用培养基重悬细胞并调整细胞密度为2-3×105个/ml。

(4) 待胶凝固后，取出24孔板，每孔加入500μl细胞悬液，做好标记后放入细胞培养箱常规培养4-6h。

(5) 结果分析：100、200倍显微镜下随机5个视野观察计数血管内皮细胞小管分枝、小管数、小管长度等。成管率=实验组成管数量/对照组成管数量*100。