实验服务
JK GREEN
实验介绍微型化，集成化，高通量化的蛋白质芯片可用于异常蛋白表达、翻译后修饰或其他生物分子相互作用导致的许多疾病的研究，从而更直接和真实地解释各种生命现象。蛋白质芯片兼具高通量、样品处理简单、用量少（可以检测低至5 - 10μg蛋白样品）、特异性和灵敏度高、可代替和互补传统检测方法、试验周期短及性价比高等优点，因此被广泛用于基础医学、生物学研究（检测生理或病理过程中相关蛋白的表达丰度变化、磷酸化水平变化），癌症研究、疾病诊断和预后评估研究、靶向药验证等领域。服务流程客户提供● 血清/血浆、细胞培养上清、组织（新鲜或冻存）服务优势● 先进的实验设备● 标准化的样本处理流程● 稳定性及重复性好● 高质量的结果呈现● 真实清晰完整的报告反馈
实验介绍酶联免疫吸附反应（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA），通过固相酶联免疫方法检测液态样本或湿试样中的物质（通常为抗原），是一种广泛应用的“wet-lab“酶联免疫类型。检测方法有用于检测抗体的间接法、检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等。服务流程客户提供● 样本：新鲜细胞培养上清液、血液样本（血清、血浆）、组织匀浆、腹腔液（胸水、腹水）、脑脊液等。如不能及时检测，请将样本分装后，冷冻保存（短期-20℃或长期-80℃）。● 样本种属：人、大鼠、小鼠、兔等。● 样本量：每个指标要求＞250ul● ELISA检测试剂盒（可由我司代购）服务优势● 标准化的ELISA操作流程● 先进的酶标检测系统● 精确的定量分析● 真实清晰完整的报告呈现
实验介绍蛋白质相互作用研究免疫共沉淀（co-IP）以细胞内源性靶蛋白为诱饵，将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育，促进免疫复合物的形成；随后加入能够与抗体FC段结合的protein-A/G（预先结合固化在琼脂小珠上），形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物，采用SDS-PAGE胶分离蛋白，并用Western blot方法进行蛋白检测，该种方法在非变性条件实验条件下进行，蛋白质之间的天然相互作用得以最大程度地保留，可以比较真实的反应蛋白质之间的相互作用，但Co-IP的缺点是不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的。融合蛋白pull-down基本原理是将一种蛋白质固定于某种基质上（如Sepharose），当细胞抽提液经过该基质时，可与该固定蛋白相互作用的配体蛋白被吸附，而没有被吸附的“杂质”则随洗脱液流出。如将目的基因构建至GST（Glutathione S transferase）标签载体上，GST融合蛋白在经过固定有GST（glutathione）的色谱柱时，就可以通过GST与GSH的相互作用而被吸附。当含有兴趣蛋白的细胞抽提物通过层析柱时，就可以与“诱饵”蛋白相互作用而被吸附分离。该方法用于体外验证两个蛋白是否有相互作用，或者寻找可能与目的蛋白有相互作用的靶蛋白。GST Pull-down实验可以通过体外实验条件，去除其它蛋白的影响，从而确定目的蛋白和待检测蛋白是否可以发生直接相互作用。蛋白质相互作用研究+质谱分析（IP+MS）免疫共沉淀与质谱结合，不仅能验证已知蛋白的相互作用，而且还可以鉴定与目标蛋白互作的未知蛋白，实现对免疫共沉淀结果的进一步确证。 服务流程客户提供● 新鲜蛋白样品（或细胞或组织）（可选）● 兴趣蛋白与靶蛋白基因相关序列（可选）● 阳性对照● 相关参考文献服务优势● 标准化的质粒构建流程● 丰富的哺乳动物细胞培养及转染经验● 高效的Co-IP及Western-Blotting/MS互助平台● 真实清晰完整的报告呈现
实验介绍原位杂交包括DNA及RNA原位杂交，通过将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，而实现对DNA或RNA的定位。基本原理为在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知探针片段，按核酸杂交中碱基配对原则，与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合（杂交），所形成的杂交体 (Hybrids）经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的DNA或RNA分子。荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization，FISH）因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性，通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。根据所用探针和靶核酸的不同，原位杂交可分为DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类，可以在细胞标本或组织标本上进行。该方法的优点在于1） 能够用于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA的研究； 2）操作不需要从组织中提取核酸，对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性，并可完整地保持组织与细胞的形态，更能准确直接地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。服务流程客户提供● 细胞标本：新鲜固定的细胞爬/涂片，或培养细胞● 组织/组织切片：新鲜组织（应在30min内实现固定）；液氮保存样本；石蜡切片或冰冻切片● 靶基因序列号● 相关参考文献服务优势● 专业化的细胞爬/涂片、切片制备技艺● 标准化的原位杂交操作流程● 先进的荧光显微拍摄系统● 真实清晰完整的报告呈现
实验介绍免疫荧光（Immunofluorescence）通过特异性荧光抗体结合细胞内的生物靶标抗原，从而实现对靶标分子在细胞内的分布及定位分析。该方法可以对组织块儿、培养细胞或单个细胞进行标记，用于分析蛋白、糖原、及生物/非生物小分子，与此同时，免疫荧光也可以DAPI、Hochest33342等其他非抗体荧光标记染料联合使用。服务流程客户提供● 细胞免疫荧光：活细胞或新鲜制备爬/涂片● 组织免疫荧光：石蜡/冰冻切片，或样本组织（新鲜或甲醛固定样本或液氮保存样本（半年内）● 蛋白特异性抗体（一抗）及荧光二抗（可由我司代购）服务优势● 专业化的切片制备技艺● 标准化的IF操作流程● 先进的荧光倒置显微镜及共聚焦显微拍摄系统● 真实清晰完整的报告呈现