价格: 200元/氨基酸
地 址:北京
周 期:3-4周
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服务简介
样品要求
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样本纯度需要在95%以上,蛋白总量在10ug左右。
我们可以对以下几种样本进行分析:冻干样本,PVDF膜和溶液样品。
PVDF膜类样品的准备过程
1.样品电泳和电转
(1)对蛋白样品进行1D或者2D跑胶
(2)将蛋白胶上的样品转移至PVDF膜上;注意:不要使用硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membranes)
(3)在此过程中请佩戴手套和头套,避免自身角蛋白对测序结果的影响
2.PVDF膜的染色
(1)染色过程中可以使用考马斯亮蓝或者立春红对PVDF膜进行染色;注意:千万不要使用银染的方法进行染色
(2)染色完成之后,可以使用双蒸水对PVDF膜进行清洗
(3)如果转膜的缓冲液中含有甘氨酸,需要对PVDF膜进行多次冲洗,以避免甘氨酸对后续分析的影响
(4)更详细的样品准备步骤与,见Edman测序样品准备Protocol
3.靶蛋白条带获取
(1)PVDF膜染色后,靶条带清晰可见,用洁净的解剖刀将靶蛋白条带切下
(2)在蛋白量允许的情况下,可以准备2-3条靶条带以增加靶蛋白的量
4.样品运输
(1)密闭包装后,冰袋运输即可
交付结果
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N端测序结果
服务详情