服务项目说明服务单价(元)备注病理阅片外聘病理专家显微镜下检查,以观察病理变化做出描述(含拍照)60元/张1片切片阅片病理报告显微镜下检查,以观察病变变化做出描述(分组典型拍照)50元/张整只动物全套脏器阅片定量分析每增加1个指标加20元,含拍照并出具分析报告60元/指标/样本定量分析半定量分析
基本原理苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。实验结果细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。HE染色图片示例
白光拍照倍数(一般为40、100、200、400)荧光拍照倍数(一般为40、100、200、400)服务项目说明服务单价(元)备注拍照(白光)同一倍数3个视野,如特殊要求价格随难度增加,请与拍照人员商定。10元/玻片显微镜拍照100元/小时免疫荧光拍照需实验前商定拍照倍数及视野。20元/玻片荧光显微镜拍照150元/小时组织芯片拍照(白光)需提前准备好组织芯片的资料及拍照要求5元/点显微镜拍照组织切片扫描提供电子版扫描图片及图片浏览分析软件60元/玻片需标准完整玻片
TUNEL检测:基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。冰冻切片tunel实验步骤1、 冰冻切片固定:冰冻切片从冰箱拿出来复温,晾干水分,冷丙酮固定10min,待丙酮完全干后于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。2、 修复:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止液体流走),在圈内滴加蛋白酶K工作液(蛋白酶K储存液用PBS 1:9稀释)覆盖组织,37度温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。3、 破膜:切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织,常温下孵育20min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。4、 加试剂1,2:按片子数量和组织大小取tunel试剂盒内适量试剂1 (TdT) 和试剂2(dUTP)按2:29混合(试剂1,2为现配现用),加到圈内覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃恒温孵育2小时,湿盒内加少量水保持湿度。5、 阻断内源性过氧化物酶:将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片放入用甲醇配制的3%过氧化氢溶液(过氧化氢:甲醇=1:9)室温避光孵育15 min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。6、 加试剂3:切片稍甩干后,每张切片加适量试剂3(converter-POD)覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。7、 DAB显色:切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下控制显色时间,阳性为细胞核呈棕黄色,自来水冲洗切片终止显色。8、 复染细胞核:Harris苏木素复染3min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。9、 脱水封片:将切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --无水乙醇Ⅰ6min -无水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。 石蜡切片tunel实验步骤1、 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。(冬天适当延长脱蜡时间)2、 修复:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止液体流走),在圈内滴加蛋白酶K工作液(蛋白酶K储存液用PBS 1:9稀释)覆盖组织,37度温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。3、 破膜:切片稍甩干后在圈内滴加破膜工作液覆盖组织,常温下孵育20min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。4、 加试剂1,2:按片子数量和组织大小取tunel试剂盒内适量试剂1 (TdT) 和试剂2(dUTP)按2:29混合(试剂1,2为现配现用),加到圈内覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃恒温孵育2小时,湿盒内加少量水保持湿度。5、 阻断内源性过氧化物酶:将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。切片放入用甲醇配制的3%过氧化氢溶液(过氧化氢:甲醇=1:9)室温避光孵育15 min,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。6、 加试剂3:切片稍甩干后,每张切片加适量试剂3(converter-POD)覆盖组织,切片平放于湿盒内,37℃温箱孵育30min。将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。7、 DAB显色:切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下控制显色时间,阳性为细胞核呈棕黄色,自来水冲洗切片终止显色。8、 复染细胞核:Harris苏木素复染3min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。9、 脱水封片:将切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --无水乙醇Ⅰ6min -无水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。 报价:服务项目说明服务单价(元)备注Tunel(POD自带试剂盒)细胞凋亡染色,客户需提供Tunel试剂盒120元/张染色含切片Tunel(公司提供试剂盒)细胞凋亡染色,公司提供罗氏POD Tunel试剂盒300元/张凋亡试剂盒代购详情请咨询工作人员官网标价九折染色含切片服务案例图片
为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。本公司可以做以下染色项目包括:服务项目说明服务单价(元)备注HE染色苏木精-伊红染色法,观察组织形态20元/张染色含切片油红O染色4%多聚甲醛固定,冰冻切片。对组织内脂质(如脂滴)染色60元/张染色含冰冻切片番红O固绿染色常用于植物、软骨组织形态染色50元/张染色含切片Masson染色观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度50元/张染色含切片天狼猩红染色观察组织纤维化程度,及偏振光进行胶原亚型的分区50元/张染色含切片PAS糖原染色观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化;肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化50元/张染色含切片阿利新蓝染色常用于软骨组织或早幼粒细胞、巨核细胞染色50元/张染色含切片甲苯胺蓝染色观察软骨组织形态或组织内肥大细胞的数量及分布50元/张染色含切片尼氏染色观察脑或脊髓等中枢神经系统内神经元尼氏体的变化50元/张染色含切片LFB髓鞘染色观察神经髓鞘的形态及变化65元/张染色含切片普鲁士蓝染色常用于吞噬细胞内铁粒子的含量和定位65元/张染色含切片VG染色显示组织胶原纤维及肌纤维的形态及变化65元/张染色含切片EVG染色观察血管弹性纤维的形态及变化65元/张染色含切片VonKossa染色观察组织内病理性钙沉积情况65元/张染色含切片刚果红染色一般用于组织淀粉样变染色65元/张染色含切片维多利亚蓝染色用于弹力纤维染色65元/张染色含切片案例图片