JK GREEN
实验介绍Western-Blotting技术被广泛用于分子生物学、免疫遗传学及其他分子生物学科,用以检测组织匀浆或提取液样本中的特定蛋白,与其相关的技术包括点印记杂交、免疫组织化学、免疫细胞化学及酶联免疫吸附法(ELISA)。SDS-PAGE凝胶电泳及转膜技术的稳定性直接影响蛋白定量结果的分析,因此对于该技术的质控分析对分子生物学相关领域的研究推进至关重要。服务流程客户提供● 组织或细胞样本(新鲜或冻存)● 抗体(一抗)服务优势● 先进的实验设备● 标准化的样本处理流程● 稳定性及重复性好● 高质量的结果呈现● 真实清晰完整的报告反馈
实验介绍染色质免疫共沉淀(ChIP)在细胞生物学领域最重要的用途是研究某个转录因子(可以是发生某些特定修饰,如磷酸化、乙酰化等修饰的蛋白)是否调控其预期靶基因的特定转录调控区(主要是启动子区域),该方法是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具。凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理。当核转录因子与一条人工合成的特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。目前生物素标记探针的EMSA实验因其非放射性、化学发光灵敏度高的特点广泛应用于该类研究。服务流程客户提供● 活细胞样本(>10^8)或核蛋白(浓度>1μg/μl,EMSA)● 目的蛋白一抗● 阴性对照IgG(ChIP)● 基因名称或序列号● EMSA试剂盒(EMSA)● 生物素标记的特异探针(EMSA)● 阳性对照(EMSA)● 相关参考文献服务优势● 成熟化的样本采集与处理系统● 标准化的ChIP/EMSA实验流程● 真实清晰完整的报告呈现
实验介绍利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究。标记对象包括细胞爬片(贴壁细胞)、细胞涂片(悬浮细胞)、组织切片(石蜡包埋或冰冻样本)。服务流程客户提供● 细胞爬/涂片:请提供1周以内的样本,或培养细胞● 石蜡切片:请提供新鲜或甲醛固定样本(一周内)或液氮保存样本(半年内)● 冰冻切片:请提供新鲜或液氮保存样本(半年内)● 蛋白特异性抗体(一抗)(可由我司代购)服务优势● 专业化的切片制备技艺● 标准化的IHC操作流程● 先进的倒置显微镜拍摄系统● 真实清晰完整的报告呈现
实验介绍单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNPs)是指由于单个核苷酸碱基的改变而导致的核酸序列的多态性,表现为一种在不同个体的同一条染色体或同一位点的核苷酸序列中,绝大多数核苷酸序列一致而只有一个碱基不同的现象,有单碱基的转换、颠换、插入及缺失等形式。SNPs的研究对于疾病相关基因定位、个体遗传差异、基因组结构研究及疾病/耐药性与个体差异的关系非常重要。PCR重测序和Multiplex SnaPshot分型是SNP检测的金标准,除此之外Taqmen探针法也是常用的SNP检测方法。PCR重测序通过PCR扩增后直接进行测序,是SNP分型检测十分有效的方法,被公认为是SNP检测的“金标准”。在测序峰图中,纯合型SNP的测序峰为单一峰型,而杂合型的为双峰,所以非常容易区分。采用这种方法,SNP检出率接近100%。Taqman探针法可用于基因荧光定量分析、甲基化检测、SNP分型、miRNA定量分析等,其核心是特异性的MGB探针技术,已证实的Taqman探针,3段结合MGB技术,能更好的进行等位基因的区分。MGB分子结合到DNA螺旋小沟,通过稳定MGB探针/模板联合体提高杂交的检验。这种超强的稳定性可使短至13个碱基的探针提高错配的辨别力,并为困难多变的序列设计提供更高的灵活性。所有的MGB探针都包括一个不发荧光的猝灭基团(NFQ),它能真正消除传统猝灭基团产生的背景荧光,提高信噪比,从而提供检测灵敏性。Multiplex SnaPshot分型的主要原理为单碱基延伸技术。即在紧邻SNP位点的地方设计引物,反应时加入SNP位点引物,扩增出的带有SNP位点的PCR产物,带荧光标记的ddNTP,通过单碱基延伸后引物带上SNP位点碱基相关的荧光,反应产物经测序仪上分析后,就能得到SNP位点的信息,该方法一个反应就能检测多个SNP位点。服务流程客户提供● 活细胞、新鲜或冻存血液/组织、石蜡包埋组织(可提取DNA量≥2μg)● DNA样本:浓度≥50ng/ul,DNA总量≥2ug,纯度 OD260/280 在1.7~1.9之间,不含PCR抑制剂● 相关背景资料或参考文献服务优势● 高通量、多位点检测● 检出率高,周期短● 发送完整实验报告
实验介绍重叠延伸PCR法(gene splicing by overlap extension PCR,SOE PCR)是指在PCR技术的基础上,采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,通过重叠链的延伸,将不同来源的片段重叠拼接起来的方法,利用该原理,可通过三步PCR程序实现针大片段的缺失或插入。全质粒PCR定点突变是指通过PCR方法向质粒中的目的DNA片段中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、点突变。利用该方法既可以实现单点突变,也可以实现多点突变,目前常用的方法是采用stratagene公司的QuikChange Site-directed Mutagenesis kit或QuikChange Multi Site-directed Mutagenesis kit来完成。突变引物的设计及突变PCR反应为定点突变能否成功的关键影响因素。服务流程客户提供● 测序确认的野生型质粒(可由我司代购)、图谱及插入位点● 待突变位点、突变后序列及载体信息● 目的基因序列信息或基因名称或序列号服务优势● 可实现长序列(>10kb)的点突变● 可对高GC、重复、发卡结构进行突变