实验服务
优势与不足：优势：通过报告基因的表达能够示踪目的基因的表达情况。不足：设计时需要对基因进行全面的分析，避免基因敲除导致内源性基因的表达下调或截短蛋白的表达。目的基因的全敲除可能引起胚胎致死或导致其他基因表达的调控紊乱，所以项目设计时需要充分分析此类风险。先全基因敲除再条件性基因敲除原理：先全基因敲除再条件性基因敲除KO first conditional ready 设计方案是通过在内含子中插入一个基因破坏盒来达到敲除的目的。除了基因破坏盒，在目的基因敲除的外显子两侧各插入一个loxP位点，因此得到的floxed（flanked by loxP）小鼠是敲除目的基因同时敲进报告基因与抗性基因的小鼠。根据实验需要，通过灵活选择Cre/LoxP重组系统或者Flp/FRT重组系统，可同时获得全基因敲除和条件性基因敲除小鼠模型。即当此floxed小鼠与全身表达Cre的小鼠交配时，可获得目的基因敲除同时敲进报告基因的小鼠。而当此floxed小鼠与Flp小鼠交配时，可修复已敲除基因的表达，在此基础上再与组织特异性表达Cre的小鼠交配又可获得目的基因条件性基因敲除的小鼠。 先全基因敲除再条件性基因敲除应用：1、通过报告基因的表达示踪所敲除目的基因的表达信息，方便基因研究；2、药物的靶标确认；3、药物的毒理学研究 做实验，找威斯腾！【本平台合作项目】分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！【全国免费热线】：400-675-6758【电话】 023-65316016,023-65316556【邮箱】 china-western@163.com【官网网址】www.cqwestern.com【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园 D 栋 2 楼
优势与不足：优点：这种打靶策略既能使目的基因的失活发生在特异性的组织或细胞中，又能使目的基因的失活发生在指定的发育年龄或阶段。可以用于制作发育或年龄相关的疾病模型。不足：设计时需要对基因进行全面的分析，避免基因敲除导致内源性基因的表达下调或截短蛋白的表达。诱导剂（他莫昔芬或四环素）可能会影响动物表型，所以得到这种小鼠模型后，需要首先检测诱导剂对表型的影响情况。诱导性的条件性基因敲除原理：诱导性的条件基因敲除系统是基于细胞核激素受体与相应的激素配体结合后，受体将由细胞浆转位到细胞核发挥其基因表达调控作用。雌激素受体（ER）就是这样一种细胞核激素受体，它能结合雌激素，并能结合雌激素的拮抗剂-他莫昔芬。当雌激素受体处于失活状态时，在胞浆中与热休克蛋白90（Hsp90）结合，不能进入细胞核；但当雌激素或他莫昔芬与雌激素受体结合后，ER与Hsp90分离并能够进入细胞核。利用ER的这一作用特点，可以控制只能在细胞核与loxP位点结合的Cre重组酶的细胞内定位。将Cre与ER融合后，在没有雌激素存在的情况下，由于ER与Hsp90结合，使Cre重组酶滞留在胞浆；但加入他莫昔芬以后，Cre-ER融合蛋白与Hsp90分离并能进入细胞核。在细胞核中，Cre与floxed（loxP-flanked）目的基因结合并发挥其重组酶活性，获得基因敲除动物模型。这一系统使用他莫昔芬，一种修饰过的雌激素受体，目的是避免雌激素受体结合内源性的雌激素，保证Cre发挥作用时间的可控性。同时Cre-ER融合蛋白的表达受组织特异性启动子的调控。应用1、具有胚胎致死性目的基因的研究；2、目的基因在发育或年龄相关疾病方面的研究；3、药物的靶标确认；4、药物的毒理学研究。 做实验，找威斯腾！【本平台合作项目】分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！【全国免费热线】：400-675-6758【电话】 023-65316016,023-65316556【邮箱】 china-western@163.com【官网网址】www.cqwestern.com【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园 D 栋 2 楼
优势与不足：优势：这种打靶策略能避免全基因敲除可能引起的胚胎致死及表型复杂等问题，同时因为目的基因只在特定组织中失活，能用于研究该基因在特定组织中的功能，而该基因在其他组织中仍能正常表达；不足：设计时需要对基因进行全面的分析，避免基因敲除导致内源性基因的表达下调或截短蛋白的表达。得到的种系遗传小鼠模型需要与组织特异性表达重组酶的小鼠交配才能得到组织特异性敲除小鼠，使后续繁殖时间比全基因敲除小鼠模型至少多交配一代。条件性基因敲除操作原理：主要是通过染色体位点特异性重组酶系统来实现的，如Cre-LoxP系统、 FLP-Frt系统和Dre-Rox系统等，其中最常用的是Cre-LoxP系统。这一系统是在待敲除的一段目的基因序列的两端各放置一个LoxP序列，得到Floxed（Flanked by loxP)小鼠。该floxed小鼠在与表达Cre重组酶的小鼠杂交前，目的基因表达完全正常，从而能够避免全基因敲除可能出现的胚胎致死。而当该floxed小鼠与组织特异性表达Cre重组酶的小鼠杂交后，即可获得目的基因在特定的组织或细胞中被敲除的小鼠，而该基因在其它组织或细胞中表达正常。floxed小鼠如果与不同的Cre重组酶小鼠杂交，可以使目的基因的敲除发生在小鼠的任一组织或细胞中。此外，如果与控制Cre重组酶表达的诱导系统相结合，还可以使目的基因的敲除发生在小鼠发育的任一阶段，实现对目的基因表达的时空两方面调控。 应用具有胚胎致死性目的基因的研究；目的基因在特定组织中的生理或病理功能研究；药物的靶标确认；药物的毒理学研究 做实验，找威斯腾！【本平台合作项目】分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！【全国免费热线】：400-675-6758【电话】 023-65316016,023-65316556【邮箱】 china-western@163.com【官网网址】www.cqwestern.com【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园 D 栋 2 楼
优势与不足：优势：打靶策略的设计及打靶载体构建简单；不足：目的基因的敲除可能引起胚胎致死或导致其他基因的表达失调。如果预测存在这种风险，可以使用条件性基因敲除设计策略。原理：常规基因敲除策略是以筛选基因新霉素（Neo）取代目的基因的一个或多个外显子来实现目的基因的敲除。该基因敲除发生在全身所有的细胞及组织中，可能存在胚胎致死风险，条件性基因敲除策略能够规避这一风险。应用：研究某个基因在全身水平上的生理或病理功能；药物的靶标确认；药物的毒理学研究 做实验，找威斯腾！【本平台合作项目】分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！【全国免费热线】：400-675-6758【电话】 023-65316016,023-65316556【邮箱】 china-western@163.com【官网网址】www.cqwestern.com【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园 D 栋 2 楼
一、服务流程：1、客户提出要求；2、根据要求制定实验方案；3、方案报价；4、沟通合同细节，签订服务合同；5、验收抗原；6、制定免疫方案；7、免疫方案审核；8、动物免疫；9、动物监控；10、效价检测；11、血清采集；12、抗体纯化；13、产品检测；14、整理实验报告15将产品和报告一起给客户。二、提供的结果：1、提供流程方案，ELISA、WB相关报告；2、抗原多肽5-10mg3、抗体10ml,抗血清5ml三、服务承诺1、SOP服务流程；2、定期汇报实验进度；3、信息严格保密。四、服务要求：1、需提供抗体的用途，如WB检测、免疫组化、ELISA等；2、蛋白相关信息，如蛋白的名称、种属、GeneBank ID号等 做实验，找威斯腾！【本平台合作项目】分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！【全国免费热线】：400-675-6758【电话】 023-65316016,023-65316556【邮箱】 china-western@163.com【官网网址】www.cqwestern.com【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园 D 栋 2 楼